Паразитические инфекции (Паразитозы) остаются значительной проблемой здоровья, затрагивающей миллионы по всему миру. Своевременная лабораторная диагностика допускает причину паразитических заболеваний, контролируя их разработку и оптимизацию их лечения. Современная лабораторная практика имеет широкий спектр диагностических методов, которые характеризуются определенной чувствительностью, специфичностью и применимостью при обнаружении паразитических инфекций.
Каковы основные традиционные лабораторные методы для диагностики паразитических инфекций?
Микроскопия Это продолжает оставаться основным методом лабораторной диагностики паразитоза, независимо от появления новых технологий. Этот подход основан на прямой визуализации паразитов, их яйцах, кисты или личинок в табурет, мочи, кровь или ткани. В кишечных паразитозах стул чаще всего анализируется после применения методов концентрации, таких как флотация или седиментация, которые увеличивают вероятность обнаружения паразитических форм. Для гемопаразитов (паразитов крови) как Плазмодий и Трипаносома Раскраска GIMA используется. Этот метод допускает подробное изучение морфологии паразитов в двух типах препаратов — тонкого крови (кровь распространяется на тонкий слой на слизистую стекло, что позволяет точно исследовать форму и структуру паразитов); и толстая капля крови (капля крови осталась толще на стекле, что увеличивает вероятность обнаружения паразитов при низкой концентрации в крови).
Серологические методы Они имеют особое значение в диагностике паразитоза, когда паразитарные агенты не могут быть обнаружены непосредственно или находятся при низкой концентрации в исследуемой выборке. Эти методы позволяют обнаружить специфические антитела или антигены паразита в образцах крови. Иммунослируемый анализ, связанный с ферментом (ELISA), косвенная иммунофлуоресценция, латекс-агглютинация и иммуноблот (Вестерн -блот) являются одними из основных методов, используемых для обнаружения прошлых или современных паразитических инфекций. Основным преимуществом серологического анализа является способность подтвердить инфекцию, когда прямое обнаружение причины затруднено.
В ряде случаев, особенно у паразитов, развивающихся во внутренних органах (например, Токсоплазма или Эхинококк) и молекулярные методы используются для обнаружения генетического материала паразита в крови, спинномозговой жидкости (CSF) или биопсийных материалах.
Современные молекулярные методы для диагностики паразитических инфекций
С учетом молекулярной диагностики в клинической практике диагностические возможности паразитических инфекций значительно расширяются. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) широко используется для обнаружения специфической нуклеиновой кислоты паразита. Этот метод характеризуется высокой чувствительностью (то есть наличие паразитного материала может быть обнаружено даже в очень небольших количествах) и позволяет обнаружить причины даже при минимальном количестве паразитной ДНК или РНК в образце.
Фактическое применение молекулярных методов включает как качественные (подтверждает наличие паразитной ДНК или РНК), так и количественную ПЦР (определяет количество паразитного материала в образце); последовательность амплифицированной ДНК (установление точной последовательности изолированной ДНК после ПЦР); А также использование мультиплексных панелей для одновременного обнаружения нескольких патогенов. Другой новой технологией является изотермическая амплификация (лампа — метод, похожий на ПЦР, при котором ДНК увеличивается при постоянной температуре), который подходит для лабораторий с ограниченными ресурсами, поскольку она обеспечивает быстрые и надежные результаты без необходимости в сложном оборудовании.
Молекулярные методы особенно полезны у паразитов с тесными морфологическими особенностями, которые трудно различить по микроскопии или когда количество паразитической ДНК в образце очень мало. Например, при инфекциях с Плазмодий (Причины малярии), которые устойчивы к стандартному лечению, полимеразная цепная реакция (ПЦР) позволяет точно определить тип и штамм паразита, что важно для выбора наиболее подходящей терапии.
В последние годы все чаще использовались методы на основе масс-спектрометрии (например, MALDI-TOF), что позволяет обнаружить причинный агент с помощью его характерного профиля белка.
Проблемы и тенденции в лабораторной диагностике паразитических инфекций
Несмотря на технологический прогресс, лабораторная диагностика паразитических заболеваний отвечает ряду проблем. Одна из основных проблем заключается в обеспечении качественных образцов и их надлежащей транспортировки, особенно с подозреваемыми паразитами с ограниченной стабильностью вне тела. Качественная подготовка лабораторного персонала имеет важное значение, особенно в морфологической дифференциации яиц, личинок и других диагностических стадий паразитов, поскольку автоматизированные системы не всегда могут заменить опыт и опыт микроскопического.
Серологические тесты не всегда допускают различие между прошлой и активной инфекцией, поэтому их результаты следует интерпретировать вместе с клинической картиной и эпидемиологическими данными. Кроме того, применение молекулярных тестов в обычной практике часто ограничено из -за их высокой стоимости, отсутствия стандартизации и необходимости в специализированном оборудовании.
В глобальном масштабе, высокочувствительные и специфические (которые дают положительный результат только в присутствии конкретной причины и не реагируют на другие паразиты) вводятся) быстрые диагностические тесты, которые позволяют своевременно идентифицировать причинный агент даже с ограниченными ресурсами. Мультиплексные диагностические панели (тесты для одновременного обнаружения нескольких патогенов в одном образце) и, следовательно,. Биопсия жидкости (анализ свободной ДНК паразита в крови), которые способствуют более комплексной оценке инфекции и контролируют влияние применяемого лечения.
Ссылки:
1. CDC: DPDX — Лабораторная идентификация паразитов заботы общественного здравоохранения
2. Ндао М. Диагностика паразитических заболеваний: старые и новые подходы. Междисциплинарные перспективы на инфекционные заболевания. 2009; 2009: 278246.
3. Всемирная организация здравоохранения. Основные лабораторные методы в медицинской паразитологии. Женева: кто; 1991.
4. D & Browska J, Grooblewska M, Bendykowska M, Sikorski M, Gromadzka G. Эффективный лабораторный диагноз паразитических инфекций желудочно -кишечного тракта: WHRE и WH для? Диагностика (Базель). 2024 г. 27 сентября; 14 (19): 2148. doi: 10.3390/Diagnostics14192148. PMID: 39410552; PMCID: PMC11475984.
5. Das S, Rajkumari N, Gunalan A, Rajavelu D, Olickal JJ. Сравнительный анализ микроскопии, серологии копрантигена и сетовой мультиплексной ПЦР в лабораторной диагностике инфекции entamoeba histolytica. J Лабораторные врачи. 2021 г. 29 июля; 14 (2): 125-131. Doi: 10.1055/s-0041-1732488. PMID: 35982881; PMCID: PMC9381307.